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IRA-900固定化琼胶酶可重复批量生产琼胶寡糖

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行业新闻
2019/11/12 18:14

  Repeated Batch Production of Agar-oligosaccharides from Agarose by an Amberlite IRA-900 Immobilized Agarase System

  图1 A表面粗糙,表明附着上琼胶酶,固定化成功;B为对照,为未附着上琼胶酶的颗粒

琼胶酶

  固定化酶与游离酶相比,具有酶与底物、产物易分离的优势,且可重复使用。本研究目的在于实现β-琼胶酶的固定化,得到性能稳定的固定化β-琼胶酶。利用扫描电镜确认琼胶酶固定在IRA-900颗粒上(图1),将固定化酶、游离酶酶解琼脂糖后的低聚糖使用OAISR HLB固相萃取小柱(SPE)富集,洗脱液旋蒸后使用50%乙腈复溶。样品使用氨基柱(2.3×100 mm,孔径3.4 µm,Waters)梯度洗脱,并串联MS(负离子模式)进行检测。检测结果表明固定化酶及游离酶可将琼脂糖酶解为二、四、六糖,但固定化酶酶解程度更高,寡糖含量更为丰富。酶在固定化后最适反应温度提高(由40 °C提高至45 °C),且在55 °C及60 °C下的温度稳定性明显提高,在4 °C、湿润状态下可保存至少3个月,在干燥状态下可保持至少6个月。

  图2 LC-MS在负离子模式下检测到固定化琼胶酶降解琼脂糖的寡糖产物为二糖、四糖及六糖。

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